Présentation sous forme d’affiche à la journée de la recherche de la Faculté de médecine de l’université Laval à Québec le 8 mai 2003.

IDENTIFICATION DE PEPTIDES INHIBITEURS DES PROTÉINES BACTÉRIENNES FTSA ET FTSZ CONTRÔLANT LA DIVISION CELLULAIRE.

Paradis-Bleau Catherine, Boudreault Lydia, El Zoeiby Ahmed, Sanschagrin François, Levesque Roger C.

Centre de recherche sur la fonction, la structure et l’ingénierie des protéines (CREFSIP).

Objectifs : Le pathogène opportuniste Pseudomonas aeruginosa hautement résistant aux antibiotiques infecte 90 % des patients atteints de fibrose kystique. Afin d’identifier de nouveaux antimicrobiens, nous exploitons la machinerie de division cellulaire procaryote en tant que cible. Méthodes: FtsA et FtsZ, deux enzymes essentielles hautement conservées, ont été surexprimées dans E. coli puis purifiées. L’activité ATPase de FtsA et GTPase de FtsZ ont été démontrées par TLC puis leur identité a été confirmée par séquençage. Nous avons criblé les banques de bactériophages C-7-C et 12-mers contenant chacune 109 fusions peptidiques différentes avec les enzymes actives. Les phages adhérés aux protéines ont été élués avec de la glycine à pH acide puis de façon compétitive avec le substrat de l’enzyme, un analogue non hydrolysable du substrat ainsi qu’avec FtsZ pour FtsA et vice-versa. L’ADN a été extrait des phages et les peptides ont été identifiés. La spécificité de l’interaction entre les peptides et FtsA ou FtsZ a été analysée par ELISA. Résultats : Nous avons identifié trois consensus peptidiques contre FtsZ ainsi que plusieurs séquences peptidiques contre FtsA. De plus, l’élution compétitive FtsA-FtsZ a mené à l’identification d’un fort consensus peptidique. La spécificité de l’interaction entre chacun des peptides mentionnés et FtsA ou FtsZ a été analysée. Conclusion : Les peptides synthétisés pourraient inhiber l’activité ATPase, GTPase et l’interaction cruciale entre FtsA et FtsZ. L’inhibition de ces enzymes est d’un intérêt majeur car elle mène à un phénotype létal permettant d’envisager la production de nouveaux antimicrobiens.